如何获得适用的接种液

生化需氧量（BOD5）测定

一、原理

生化需氧量是指在规定的条件下， 微生物分解存在于水中的某些可氧化物质， 主要是有机物质所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。分别测定水样培养前的溶解氧含量和 20±1℃培养五天后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化过程中所消耗的溶解氧量（BOD5）。

对于某些地面水及大多数工业废水、生活污水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度，保证降解过称在有足够溶解氧的条件下进行的。其具体水样稀释倍数可借助于高锰酸钾指数或化学需氧量（CODcr）推算。

对于不含或少含微生物的工业废水，在测定 BOD5时应进行接种，以引入能分解废水中有机物的微生物。 当废水中存在难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应接种经过驯化的微生物。

二、仪器

1、恒温培养箱

2、5-20L 细口玻璃瓶

3、1000—2000mL 量筒

4、玻璃搅棒：棒长应比所用量筒高长 20㎝。在棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并带有几个小孔的硬橡胶板。

5、溶解氧瓶：200-300mL，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。

6、宏吸管：供分取水样和添加稀释水用。

三、试剂

1、磷酸盐缓冲溶液：将 8.5g 磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g 磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g 磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和 1.7g 氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至 1000mL。此溶液的 PH 值应为 7.2。

2、硫酸镁溶液：将 22.5g 硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至 1000mL。

3、氯化钙溶液：将 27.5g 无水氯化钙溶于水中，稀释至 1000mL。

4、氯化铁溶液：将 0.25g 氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水，稀释至1000mL。

5、盐酸溶液（0.5mol/L）：将 40 mL（ρ=1.18g/ mL）盐酸溶于水，稀释至 1000mL。

6、氢氧化钠溶液（0.5mol/L）：将 20g 氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。

7、亚硫酸钠溶液（C1/2 Na2SO3=0.025 mol/L）：将 1.575g 亚硫酸钠溶于水，稀释至 1000mL。此溶液不稳定，需每天配制。

8、葡萄糖—谷氨酸标准溶液：将葡萄糖（C6H12O6）和谷氨酸钠（HOOC—CH2—CH2—CHNH2—COOH）在 103℃干燥 1h 后，各称取 150mg溶于水中，移入 1000 mL 容量瓶内并稀释至标线，混合均匀。此标准溶液临用前配制。

9、稀释水：在 5-20L 玻璃瓶内装入一定量的水，控制水温在 20℃左右。然后用无油空气压缩机或薄膜泵，将此水曝气 2-8h，使水中的溶解氧接近饱和，也可以鼓入适量纯氧。瓶口盖以两层经洗涤晾干的纱布，置于 20℃培养箱内放置数小时，使水中的溶解氧量达到8mg/L。临用前于每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲溶液各 1mL，并混合均匀。

稀释水的 PH 值应为 7.2，其 BOD5应小于 0.2 mg/L。

10、接种水：可选用以下任一方法，以获得适用的接种液。

（1） 城市污水，一般采用生活污水， 在在室温下放至一昼夜，取上层清液使用。

（2） 表层土壤浸出液，取 100g 花园土壤或植物生长土壤，加入 1L 水，混合并静置 10min ，取上清液供用。

（3） 用含城市污水的河水或湖水。

（4） 污水处理厂的出水。

（5） 当分析含有难于降解的废水时， 在排污口下游 3-8km 处取水样作为废水的驯化接种液。如无此种水源，可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气、每天加入少量该种废水，同时加入适量表层土壤或生活污水，使能适应该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量絮状物，或检查其化学需氧量的降低值出现突变时，表明适用的微生物已进行繁殖，可用作接种液。一般驯化过程需要 3-8 天。

11、接种稀释水：取适量接种液，加于稀释水中，混匀。每升稀释水中接种液加入量生活污水为 1-10 mL；表层土壤浸出液为20-30mL；河水、湖水为 10-100mL。

接种稀释水的 PH 值应为 7.2，其 BOD5值宜在 0.3-1.0 mg/L 之间为宜。接种稀释水配制后应立即使用。

如何按需选择培养基及其接种方法

选择培养基没有一定的标准，有几点建议可供参考：

(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参

考文献，或在购买细胞株时咨询。

(2)其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。

(3)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选RPMI1640 。

(4)用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择最佳培养基，这是最客观的方法，但比较繁琐。

细菌的接种方法有很多种，如划线法、涂布法、倾注法、斜面接种法、液体培养基接种法、螺旋接种法等，其方法和应用各有不同，

划线法：此法主要用于菌种分纯，获得单菌落

由接种环沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。

优点：可以观察菌落特征，对混合菌进行分离。

缺点：不能用于菌落计数。

涂布法：此法主要用于菌落总数计数

先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中，然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液接种在已凝固的琼脂平板上。再用无菌L型玻璃棒将菌液在平板上涂抹均匀，将涂抹好的平板平放于桌上20~30min，使菌液渗透入培养基内，然后将平板倒转，保温培养，至长出菌落后即可计数。

优点：可以计数，可以观察菌落特征。

缺点：接种前需梯度稀释，吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延。

倾倒法：此法主要用于菌落总数的计数

吸取1ml菌液加入平板中，倒入已融化并冷却至45~50℃的细菌培养基，轻轻转动平板，使菌液与培养基混合均匀，冷疑后倒置，适温培养。至长出菌落后即可计数。

优点：可以计数，较方便。

缺点：接种前需梯度稀释，不能观察菌落特征，不适用于严格好氧菌和热敏感菌。

斜面接种法：此法主要用于保存菌种，或观察细菌的某些生化特性和动力

用接种环或接种针伸入菌种管内，挑取用来移种的菌落。伸入斜面培养管内，先从斜面底部到顶端拖一条接种线，再自下而上蜿蜒划线，或直接自下而上地蜿蜒划线。接种完成之后，用火焰灭菌培养管口，并塞上棉塞，置于37℃培养。

液体培养基接种法：此法主要用于菌液比浊实验

用灭菌接种环挑取菌落或标本，在试管内壁与液面交界处轻轻研磨，使细菌均匀得散落在液体培养基中。

螺旋接种法：此法主要用于菌落总数计数

Spiral plater 可以在无任何全部或中间稀释的情况下快速细菌接种。对数减少的样品容量以阿基米德螺旋线的形式被自动分注在旋转式培养基表面。培养基上每一点的容量可以被知晓和校准。菌液的浓度可以通过培养皿上一定区域的菌落数量除以同区域样品分注量来计算。

优点：螺旋接种法菌液无需稀释（其他接种方法均需经过梯度稀释才能计菌落数），自动化接种，效率高，可节省3/4的耗材和时间

缺点：产品成本高，适用于样品量比较大的实验

微生物接种方法有哪几种？

一、平板划线接种法（分离培养法）

这种方式是将细菌分离培养的常用技术，其目的是将混有多种细菌的培养物，或标本中不同的细菌（病原菌与非病原菌）使其分散生长，形成单个菌落或分离出单一菌株，便于识别鉴定。平板划线接种方法较多，其中以分段划线法与曲线划线法较为常用。

二、斜面接种法

此法主要用于移种纯菌，使其增殖后用于鉴定或保存菌种。通常是从平板培养物上挑取某一单独菌落或者从一支已长好的斜面菌种，移种至斜面培养基上，接种步骤如下（以从已长好的斜面菌种转接为例）

三、倾注培养法

本法用于饲料中细菌、霉菌的计数。方法是取原始样品或经适当稀释的（通常是10-1~10-5 稀释）液体1mL，置于直径9cm无菌平皿内，倾入已融化并冷至50℃左右的培养基约13~15mL ，立即混匀，待凝固后倒置，于一定温度下培养一定小时，作菌落计数。

四、穿刺接种法

此法多用于双糖、半固体、明胶等培养基的接种，方法与斜面接种类似。用接种针挑取菌落或菌液少许，由培养基表面中央直刺至管底（若为三糖铁并在斜面加以涂布），然后沿穿刺线拔出接种针（注：接种半固体看动力者不穿刺到底）。

五、液体接种法

此法多用于单糖发酵试验等，接种方法与斜面接种方法基本相同。以左手持培养基与菌种管，右手持接种环和拔持棉塞，将挑取的菌落或菌液接种于液体培养基内。

扩展资料：

接种细菌应用接种针（环）来沾取细菌标本，进行接种。接种环与接种针为用白金丝或 合金丝所制，亦可用电炉丝代替，因它能耐高热且散热快，便于接种前后通过火焰灭菌（整个接种环烧红即达到灭菌目的）。

在使用接种环时一般用右手持笔式较为方便，左手可持培养基进行配合，其接种程序可分为：灭菌接种环→稍冷→沾取细菌样品→进行接种（包括：启盖或塞、接种划线、加盖或塞）→进行接种环灭菌等五个程序。不同培养基，接种方法也不同。

参考资料：本站—接种

儿科补液基础知识

（一）：根据患儿体重（kg）计算24h生理需要量将体重“拆分”为若干个“10kg”，第一个“10kg”按100ml/kg计算，第二个“10kg”按50ml/kg计算，两个“10kg”后剩余体重按20ml/kg计算，最后累加。

举例：23kg患儿生理需要量

10kg：10 100=1000ml

10kg：10 50=500ml

3kg ：3 20=60ml

23kg：10 100+10 50+3 20=1560ml

（二）：根据体重计算禁食患儿生理需要量的补充速度患儿禁食时，将每日生理需要量24小时均匀输入，每日生理需要量 24即可得到每小时的输液速度。

举例：23kg禁食患儿生理需要量的补充速度 1560ml/24h=65ml/h

（三）：计算腹泻患儿的累积损失量轻、中度脱水补液的第一步为补充累积损失量；重度脱水第一步为扩容，第二步为补充累积损失量。累积损失量根据患儿的体重及脱水程度进行计算。

轻度脱水：30~50ml/kg

中度脱水：50~100ml/kg

重度脱水：100~120ml/kg

举例：

23kg 中度脱水患儿

23kg （50~100ml/kg）=1150~2300ml

（四）：判断液体的渗透压及张力 人体正常血浆渗透压在280~320mmol/L，若某溶液的渗透浓度在该范围内，则认为该溶液为等渗溶液；若某溶液的渗透浓度低于该范围，则认为该溶液为低渗溶液；若某溶液的渗透浓度高于该范围，则认为该溶液为高渗溶液。0.9%氯化钠注射液的渗透浓度约为307.7mmol/L，因此属于等渗溶液；5%葡萄糖注射液的渗透浓度约为277.5mmol/L，也近似属于等渗溶液。5%葡萄糖氯化钠注射液，该葡萄糖的浓度为5%，氯化钠的浓度为0.9%，两种溶质的浓度均达到了等渗浓度，相当于两倍的等渗浓度，因此属于高渗。0.9%氯化钠注射液不仅是等渗溶液，同时由于其产生渗透压的溶质氯化钠具有维持血浆渗透压的能力，因此，该浓度的氯化钠溶液也被称为“等张溶液”。

举例：

5%葡萄糖注射液 等渗溶液 无张溶液0.9%氯化钠注射液 等渗溶液 等张溶液5%葡萄糖氯化钠注射液 高渗溶液 等张溶液5%碳酸氢钠注射液 高渗溶液 高张溶液 10%氯化钠注射液 高渗溶液 高张溶液10%葡萄糖注射液 高渗溶液 无张溶液

注射用水 低渗溶液 无张溶液

（五）：根据体积比判断液体的张力将一定体积的等张液体与一定体积的无张力液体混合，假设原有等张液体的体积与原有无张力液体的比例为x:y，即可认为混合后的液体张力为x/(x+y)张

举例：

5%葡萄糖注射液50ml+0.9%氯化钠注射液50ml.

液体张力=50ml/50ml+50ml=1/2张

（六）：按照体积比配制不同张力的液体举例：已知本组液体为1/2张液体，5%葡萄糖注射液100ml，0.9%氯化钠注射液Xml？

X/100+X=1/2

得出液体量：X=100ml

（七）：根据体积比判断氯化钠的浓度及液体的张力举例：已知5%葡萄糖注射液100ml，0.9%氯化钠注射液100ml，液体浓度？液体张力？

液体浓度=0.9%*100ml/100+100ml

=0.45%

液体张力=100ml/100+100ml=1/2张

（八）：按照浓度配制不同张力的液体举例：已知5%葡萄糖注射液100ml中加入10%浓氯化钠注射液10ml，液体张力是多少？若加入的10%浓氯化钠注射液量为10ml的1/2（即5ml）？若加入的10%浓氯化钠注射液量为10ml的1/3（即3.3ml）？

液体张力=10%/0.9%*10ml/100ml=1.11张

液体张力=10%/0.9%*5ml/100ml=0.55张

液体张力=10%/0.9%*3.3ml/100ml=0.37张

（九）：2:3:1液、4:3:2液、2:6:1液的基础知识提示：正常人血浆中Na+与Cl-的比例并非1:1，[Cl-] [Na+]，然而当我们使用氯化钠注射液补液时，输入的Na+和Cl-却是1:1，因此可导致高氯血症。 在肾小管，Cl-和HCO3-的重吸收存在相互竞争关系，当Cl-增多时，可导致肾小管对HCO3-的重吸收减少，引起或加重代谢性酸中毒。 因此，在对腹泻患儿进行补液时，常采用氯化钠、碳酸氢钠按照一定比例配制成2:3:1液、4:3:2液或2:6:1液。上述三种液体的名称中，从左到右3个数字所代表的均为“盐”、“糖”、“碱”。“盐”：特指等张含钠液，如0.9%氯化钠溶液

“糖”：葡萄糖溶液，不考虑浓度“碱”：特指等张碱液，如1.4%的碳酸氢钠溶液

举例：

2:3:1液：2+1/2+3+1=1/2张

4:3:2液：4+2/4+3+2=6/9=2/3张

2:6:1液：2+1/2+6+1=1/3张

（十）：如何配2:3:1液体？已知：5%葡萄糖注射液100ml中加入10%浓氯化钠注射液xml和5%碳酸氢钠注射液yml，可配制成2:3:1液。求x，y。

方程式

① (x 10% 0.9%)+(y 5% 1.4%)=(100+x+y) 2方程式

② (x 10% 0.9%)=(y 5% 1.4%) 2

解：x 3.2，y 5也就是说，5%葡萄糖注射液100ml中加入10%浓氯化钠注射液3.2ml和5%碳酸氢钠注射液5ml，可配制成2:3:1液。

5%葡萄糖注射液 100ml+10%浓氯化钠注射液 3ml+5%碳酸氢钠注射液 5ml

实际应用时，亦可根据需要将其等比例放大

（十一）：低钾血症患儿补钾量的计算轻度低钾血症每天补钾3mmol/kg，中重度低钾血症每天可补钾4~6mmol/kg。已知：氯的原子量35.5，钾的原子量39，氯化钾分子量74.5，1mol氯化钾质量为74.5g。1mmol氯化钾质量为0.0745g，相当于10%氯化钾0.745ml。

举例：23kg ，重度低钾，每天补钾量？

23kg （0.745ml~1.49ml）/d

=17.25~34.5ml/d

（十二）静脉补钾浓度的控制5%葡萄糖注射液 100ml----10%氯化钾注射液 1ml思路：混合后的溶液为101ml，近似看作100ml，也就是说，1ml的氯化钾注射液被稀释至100ml，氯化钾浓度应变为原来的1/100，即浓度变为0.1%。同理，若100ml液体中加入10%氯化钾注射液1.5ml，则氯化钾浓度为0.15%；加入10%氯化钾注射液2ml，则氯化钾浓度为0.2%；加入10%氯化钾注射液3ml，则氯化钾浓度为0.3%。由此可见，静脉补液时，每100ml液体中加入10%氯化钾注射液的量不应超过3ml。

（十三）：根据低钠血症程度选择补钠浓度及剂量提示：低钠血症需要补钠治疗时，根据低钠血症的程度选择含钠液浓度。血[Na+] 120mmol/L：采用0.9%氯化钠溶液血[Na+] 120mmol/L：采用3%氯化钠溶液剂量如下：为使血钠浓度提高10mmol/L，需要0.9%氯化钠溶液40ml/kg或3%氯化钠溶液12ml/kg，值得注意的是，40 0.9%=12 3%，说明上述两种方案的补钠量是“等价”的

（十四）：3%氯化钠溶液的配制（用5%葡萄糖溶液及10%浓氯化钠注射液）假设：5%葡萄糖注射液 xml，10%氯化钠注射液yml，可配成3%氯化钠溶液。求x:y。

解：y 10%=(x+y) 3%

10y=3x+3y

7y=3x

x:y=7:3

即5%葡萄糖注射液与10%氯化钠注射液按照7:3比例混合，可配成3%氯化钠溶液。换句话说，配制3%氯化钠溶液时，7/10用葡萄糖注射液，3/10用10%氯化钠注射液

（十五）：3%氯化钠溶液的配制（用注射用水及10%浓氯化钠注射液） 假设：注射用水 xml，10%氯化钠注射液yml，可配成3%氯化钠溶液。求x:y。

解：y 10%=(x+y) 3%

10y=3x+3y

7y=3x

x:y=7:3

即注射用水与10%氯化钠注射液按照7:3比例混合，可配成3%氯化钠溶液。换句话说，配制3%氯化钠溶液时，7/10用注射用水，3/10用10%氯化钠注射液。

（十六）：3%氯化钠溶液的配制（用0.9%氯化钠注射液及10%浓氯化钠注射液） 假设：0.9%氯化钠注射液 xml，10%氯化钠注射液yml，可配成3%氯化钠溶液。求x:y。

解：x 0.9%+y 10%=(x+y) 3%

0.9x+10y=3x+3y

7y=2.1x

x:y=10:3即0.9%氯化钠注射液与10%氯化钠注射液按照10:3比例混合，可配成3%氯化钠溶液。换句话说，配制3%氯化钠溶液时，10/13用0.9%氯化钠注射液，3/13用10%氯化钠注射液。

（十七）：补钠低钠血症需要补钠治疗时，根据低钠血症的程度选择含钠液浓度。血[Na+] 120mmol/L：采用0.9%氯化钠溶液血[Na+] 120mmol/L：采用3%氯化钠溶液剂量如下：为使血钠浓度提高10mmol/L，需要0.9%氯化钠溶液40ml/kg或3%氯化钠溶液12ml/kg。在实际操作时，通常以130mmol/L为血钠期望值，且一般先补计算结果的一半。

举例：患儿体重8kg，腹泻3天，在诊所静滴葡萄糖补液。血钠122mmol/L。分析：患儿低钠血症，血钠 120mmol/L，治疗可采用0.9%氯化钠注射液。血钠期望值定为130mmol/L。计算如下0.9%氯化钠注射液（ml）=(130-122) 10 40 8=256先补一半，为256ml 2=128ml

（十八）：补钠低钠血症需要补钠治疗时，根据低钠血症的程度选择含钠液浓度。血[Na+] 120mmol/L：采用0.9%氯化钠溶液血[Na+] 120mmol/L：采用3%氯化钠溶液剂量如下：为使血钠浓度提高10mmol/L，需要0.9%氯化钠溶液40ml/kg或3%氯化钠溶液12ml/kg。在实际操作时，通常以130mmol/L为血钠期望值，且一般先补计算结果的一半。由于血钠上升过快可导致永久性神经系统损害，故需控制输注速度，一般建议输注时间至少4~6小时。

举例：患儿体重8kg，腹泻4天，曾多次喂白开水，并在诊所静滴葡萄糖补液。血钠115mmol/L。分析：患儿低钠血症，血钠 120mmol/L，治疗采用3%氯化钠注射液。血钠期望值定为130mmol/L。计算如下3%氯化钠注射液（ml）=(130-115) 10 12 8=144先补一半，为144ml 2=72ml

（十九）：补碱补碱并不适合所有酸中毒（比如糖尿病酮症酸中毒这种“产酸型”酸中毒），然而对于腹泻这种“失碱型”代酸，补碱往往是必要的。补碱量的确定，可根据血清碳酸氢根浓度（[HCO3-]）或动脉血剩余碱（BE）进行计算，公式如下5%碳酸氢钠注射液(ml)=(18-[HCO3-]) 体重，先补计算量的一半。5%碳酸氢钠注射液(ml)=|BE| 体重 0.5，先补计算量的一半（故此处实际上将会两次乘以0.5）。若无上述指标作为参考，亦可先按2~3ml/kg进行补充。使用时可将5%碳酸氢钠稀释1~2倍，或稀释成1.4%的等张液，紧急情况下可不稀释。

举例：患儿体重7kg，腹泻4天，血[HCO3-]14mmol/L。补碱量计算如下5%碳酸氢钠注射液(ml)=(18-[HCO3-]) 体重=(18-14) 7=28先补一半，为28ml 2=14ml医嘱示例：5%葡萄糖注射液 36ml ivdrip----5%碳酸氢钠注射液 14ml

（二十）：补碱补碱并不适合所有酸中毒（比如糖尿病酮症酸中毒这种“产酸型”酸中毒），然而对于腹泻这种“失碱型”代酸，补碱往往是必要的。补碱量的确定，可根据血清碳酸氢根浓度（[HCO3-]）或动脉血剩余碱（BE）进行计算，公式如下5%碳酸氢钠注射液(ml)=(18-[HCO3-]) 体重，先补计算量的一半。5%碳酸氢钠注射液(ml)=|BE| 体重 0.5，先补计算量的一半（故此处实际上将会两次乘以0.5）。若无上述指标作为参考，亦可按先2~3ml/kg进行补充。使用时可将5%碳酸氢钠稀释1~2倍，或稀释成1.4%的等张液，紧急情况下可不稀释。

举例：患儿体重8kg，腹泻5天，血BE -14mmol/L。补碱量计算如下5%碳酸氢钠注射液(ml)=|BE| 体重 0.5=14 8 0.5=56先补一半，为56ml 2=28ml医嘱示例：5%葡萄糖注射液 72ml ivdrip----5%碳酸氢钠注射液 28ml。

以上仅为个人在前人基础上的总结，仅做参考。

常用的免疫接种方法有哪些？

预防免疫已成为家禽疾病防治中的重要环节，在生产实践中常用的免疫接种方法有滴鼻、点眼免疫法，饮水免疫法，注射免疫法和喷雾免疫法，必须掌握正确的免疫接种方法及其注意事项。具体选用哪种接种方法应根据疫苗种类、日龄及免疫目的而定，一般应以疫苗的说明书为准。

（1）滴鼻、点眼免疫

滴鼻、点眼免疫能确保每只鸭得到准确疫苗量，达到快速免疫，形成良好的局部免疫，抗体效果好，用于弱毒活疫苗的接种，适应于任何日龄，对于幼雏来说，这种方法可以避免或减少疫苗病毒被母源抗体的中和，免疫效果较好。这种免疫法可以产生整齐、均匀的免疫力，节省疫苗，但是逐只接种，比较费时费力。操作时应使用厂家配套的稀释液和滴头；配制疫苗时摇动不要太剧烈；疫苗要现配现用，2小时内用完；疫苗避免受热和阳光照射；点眼时滴头距离眼1厘米，以防戳伤眼；滴鼻时，用食指封住一侧鼻孔，以便疫苗滴能快速吸入；滴鼻、点眼时，待疫苗在眼或鼻孔吸收后再放开鸭；免疫接种后的废弃物应焚毁。

（2）饮水免疫

饮水免疫是一种便捷的接种方法，在生产中应用较多，将一定量疫苗放入水中让鸭自由饮用，通过吞咽疫苗，病毒离子经腭裂、鼻腔、肠道，产生局部免疫及全身免疫。比个体免疫省时省力，但饮水免疫疫苗用量多，免疫不均匀，个体饮入疫苗量不准确。为保证免疫效果，必须注意用于饮水免疫的疫苗是高效价的，免疫前可加免疫增效剂；免疫前后3天不能饮水消毒；免疫前后1～2天禁止使用抗病毒药物；免疫前视季节和舍温情况限水2～3小时，以便及时饮水，并在短时间内饮完；在水中加入0.2%～0.3%的脱脂奶粉；不能使用金属器皿，稀释疫苗用水量要适当，使用清洁不含氯、铁等离子的水稀释。

（3）注射免疫

注射接种最常用的是皮下注射、皮内注射、肌内注射、静脉注射等免疫方法。注射接种时，要注意油乳剂疫苗启封后，要在当天用完，活疫苗在2小时内用完；接种过程中，注意摇匀疫苗；注射器要严格消毒，勤换针头；接种前将油乳剂疫苗放置至温度25℃左右，一般至室温；疫苗使用时不要直接倾倒，以免污染，可以用干净的连续注射器抽取；接种过程中注意调校注射器以保证剂量准确；油乳剂疫苗如有冻结破裂现象、异物或杂质存在不能使用；注射两种油乳剂疫苗时，应避免两种疫苗接种在同一点上。

（4）喷雾免疫

此方法是用压缩空气通过气雾发生器，使稀释的疫苗形成直径1～10微米的雾化粒子，均匀的浮游于空气中，随呼吸而进入体内，以达到免疫的目的。免疫前后可使用抗应激的药物，来增强免疫效果。操作时，应该注意使用高效价的疫苗，剂量加倍；用蒸馏水或去离子水稀释疫苗；雾粒直径以1～10微米为最佳；气雾免疫时房舍应密闭，减少空气流动，并应无直射阳光为好。这种方法省时省力，适宜大群的免疫接种，有时会诱发呼吸道疾病。

免疫接种方法有哪些？在应用中如何确定？

免疫接种方法根据其接种途径可分为：滴鼻、滴眼、气雾、饮水、刺种、皮下或肌肉注射等。采用哪种免疫接种方法，既要考虑疫（菌）苗的特性和免疫效果，又要考虑操作方便和经济效益。

（1）滴眼滴鼻免疫。这种接种方法劳动强度大，时间长，对操作人员的责任心要求强。虽然禽群应激反应较大，但免疫效果确实，尤其适合预防呼吸道疾病的活疫苗。适用于鸡新城疫Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ系疫苗，鸡传染性支气管炎疫苗和鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗的接种。滴眼滴鼻的工具可用滴管或滴眼瓶。事先用1毫升水试一下，看能滴多少滴，按每羽1～2滴，根据疫苗包装用生理盐水稀释，不宜用冷开水，以免其中的杂质杀死部分病毒，影响效果。此方法多用于雏鸡，将稀释好的疫苗点眼或滴入鼻孔内，滴眼的效果稍好于滴鼻。两滴疫苗最好分别滴进眼和鼻孔内。其操作的关键是接种后稍等片刻，待疫苗液确已吸入眼或鼻内再放开鸡只。

（2）饮水免疫。它能减轻劳动强度和鸡群应激，适合建立消化道及呼吸道的局部免疫。但其影响因素较多，尤其对环境温度、疫苗剂量、水质、饮水量、饮水器卫生等注意不够时免疫效果将受到较大影响。可靠性差，主要是免疫水平不整齐。由于本方法要求使用活疫苗，所以在我国目前的条件下，不适宜过多地采用饮水免疫。饮水免疫是将疫苗溶于饮水中，让鸡群在1～2小时以内饮完。可用于新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病、禽脑脊髓炎等弱毒疫苗都可以采取饮水免疫。为了使饮水免疫达到一定的效果，必须注意如下几点：①采用饮水免疫的疫苗必须是高效价的，用量加倍或再稍多一点。②为了使含有疫苗的饮水能在1～2小时以内饮完，先要停水2～5小时，依气温而定，温度高停水时间短，反之则长。每只鸡的饮水量大约是：5～7日龄4～5毫升，10～14日龄8毫升，20日龄12毫升，28日龄17毫升，40～50日龄28毫升，开产前70毫升。饮疫苗后也要停止饮水1小时。③为了减少疫苗损失，最好能在稀释疫苗的水中加入0.3%的脱脂奶粉或鲜牛奶。鲜牛奶应煮沸，静置冷却，滤除表层奶脂，再加入饮水中。④饮水免疫时，饮水器要充足，以保证所有的鸡能在短时间内饮到足够的免疫量。饮水器要清洁卫生，不要用金属饮水器。⑤采用饮水免疫时，二次免疫间隔时间不宜过长。

（3）气雾免疫。可以节省劳动力。若操作得当则效果甚好。很适合对呼吸道有亲嗜性的弱毒疫苗。如新城疫Ⅳ系苗、鸡传染性支气管炎疫苗。但本方法容易激发呼吸道感染，引起慢性呼吸道病的暴发。所以免疫前必须对气雾机的性能进行测试，严格控制雾滴大小。一般雏鸡用雾滴的直径为30～50微米，成年鸡为5～10微米。喷雾前后几天应在饲料或饮水中添加适量抗菌药。

（4）注射与刺种。这两种方法均能使抗原完整迅速地到达淋巴结等免疫器官，所以适用于大多数疫苗的免疫，如果能保证剂量准确，则效果很好。其不足之处是费工费时，对鸡群应激较大，操作时禁止使用未消毒的器具，尤其吸取疫苗的针头与注射针头要绝对分开。疫苗应随用随稀释。有些场在接种上千甚至几万只鸡前，一次将几十瓶或上百瓶疫苗稀释完，置于常温下不断使用，这样越后用的疫苗效价越低，尤其是在稀释液质量不好或环境温度偏高的情况下，效果更差。另外，要经常核对注射器的实际注射量，以及刺种器内是否蘸满疫苗也非常重要。

刺种适用于鸡新城疫Ⅰ系疫苗、鸡痘疫苗的接种。可用刺种针、蘸水笔或用大号缝衣针将针鼻磨去一半，蘸取稀释好的疫苗，刺种在鸡翅无血管处的皮下。每1000羽的疫苗可用25毫升生理盐水稀释，充分摇匀后进行刺种。

注射时用注射器将疫（菌）苗注射到肌肉或皮下。肌肉注射的部位可在肌肉丰满处，如胸部肌肉或腿部肌肉。对小鸡采用肌肉注射时，要特别注意，以免刺入太深，刺到肝脏或心脏，造成死亡。皮下注射的部位选择鸡的颈中部皮下，由上向下注射。它适用于各种油乳剂灭活苗的免疫。

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